单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于免疫抗体植物物种特女性朋友、寡核苷酸突显成本预算比较高或运作工艺流程比较复杂。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯硕士生导师团队合作在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低人工成本、跨植物物种、全平台网站兼容的全新解决方案。

期刊杂志概述

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内 有效院基因的与大怪物学研发所和国内 基因的学好举办的国家科研杂志刊物，秉承于简报宝宝有效和医学界基因的学业务行业的创作者性研发成果展。JGG 2025年度干扰因素7.1，Scopus科研杂志刊物品价指标值CiteScore 9.9，稳居JCR 2025年度GENETICS & HEREDITY业务行业Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY业务行业Q1区，稳居国内 有效院杂志刊物分离怪物学专业类别1区(Top杂志刊物)，基因的学和血生化与大分子怪物学小类双1区。

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哪种是HEATag

合理的“二三合一”规划

HEATag是由凝集素和HUH内切酶形成的容合核蛋白

「准确定位器」版块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化遮盖（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「拼接器」摸块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）引索条状码做共价连结。

“1+1>2”的使用效果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样本量记号与追溯。

Fig1: HEATag多方面标签目的展示图

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HEATag又有大多能打？

可以在各种的条件下，达成喂奶植物神经元系单神经元混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。钻研团队合作为 HEATag 制定了多轮 “压力差软件测试”，从人体细胞膜系到人体细胞膜核，从常溫到环境温度，从新鲜样版到固定住样版，全定位认证它的稳定的性和能信性。

每轮测试仪对于喂奶甲壳动物上皮内部系：设计工作员会选择了来人、鼠、仓鼠四个种类的两种上皮内部（HEK293T、K562、MEF、CHO），在室内温度下要 HEATag 标识后比调测序。以后回收处理的 11447 个上皮内部中，85.66% 都能根据 HEATag 条状码确切识别到原种类，范本间交错废弃物较少，UMAP 聚类剖析法剖析往往直接性表明，HEATag 条状码与种类特喜欢的人基因组组优点间距相同。 之后，自测前提进两步升到：科学实验职工体验在 4℃下记号生鲜肿瘤生殖细胞核系系、在空调温度下记号甲醇进行固定住肿瘤生殖细胞核系系，以及直接的记号肿瘤生殖细胞核系系核。結果显示始终优异：因此前提下，样品标识与种类短信均具备有特好的涉及到性，转换精确率超 95%。殊不知甲醇进行固定住会出现经微的转录本相交造成的污染，肿瘤生殖细胞核系系核光催化原理有一点 RNA 流失量，肿瘤生殖细胞核系系品类的注脚結果显示始终与生鲜样品始终维持完全一致，关系证明 HEATag 能记号的不同办理前提下的科学实验样品。

Fig2: HEATag 可在各种不同状况下搞定单组织转录组混样了解

也能标出蒲乳期昆虫和海洋生物无脊椎神经昆虫的原代组织细胞

一旦说上皮人体细胞系测试仪是 “理论知识题”，那聚集样表都是 “额外添加题”， 以下样表往往会因上皮人体细胞款式更复杂、生态环境融入性独特，为标上方法的 “瓶颈问题”，而 HEATag 恰恰恰在以下 “瓶颈问题” 上增添了的优势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸组织化，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不禁能被精确度判别，一切主要内部内型的聚类分析法最终都比较清楚可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海洋能菌物的更换性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条型码与外来物种转录组有较高不符性，沒有发生因高盐区域产生的 “标签损坏”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可实现目标母乳喂奶动物界团队样版多沉 scRNA-seq 浅析

Fig4: HEATag可达成生鲜海洋环境无脊柱生物各种方面 scRNA-seq 分折

HEATag与组织细胞的融入是不会诱发转录组的特殊改变了

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在完整标记图片任何的同样，就不会对事后的转录成分析致使扰乱， 保障了论述数据信息的实际性。

Fig5: HEATag也不会的影响样板的 RNA 表答形式

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发展可期

HEATag 能为单血细胞探讨带动什么样？

HEATag 的附加值，远不已于 “解决办法符号故障 ”，它的灵便性和共通性，目前在为单组织细胞学习访问越多很有机率

从软件环境方面看

HEATag 能包含从 “简短相对具体分析”（如癌组建与健康组建、药物治疗处里与相较比较）到 “大的面积的科学研究”（如组建体细胞系图谱编写、高通骁龙量选择）的全标准的需求。跟着 PIP-seq、Stereo-cell 等新颖可扩容技艺的开发，HEATag 还能进每一步不断提升单体细胞系的科学研究的通量，动力科学研究技术团队实施更重的面积的该项目。

从跨行业领域发展空间看看

HEATag 不但可应用于转录组学，还能与表观基因组组学、蛋白酶质组学、服务器组学等技術融合，借助私人定制字段和寡核苷酸回文序列，HEATag 能否不累构建不同于的组学的流程，不后果数据采集宽度。一同，系统设计HEATag还能否趋势单生殖细胞糖组学钻研技術。

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合作关系动态展示

拜谱生态学与陈凯教导制定目标开始公司合作有意向

比较适合重视的是，在 HEATag 方法能够 出很大软件应该用发展空间的背景图下，拜谱动物已与南边海上科学深入分析与过程佛山实验设计报告室（郑州）陈凯副教授形成阶段性合作项目意向性。两方计划表环绕 HEATag 方法的第三产业的发展起飞、研发管理生成等目标生成深浅共建，引领一项低价格、跨外来物种的单体肿瘤细胞核标注方法快些软件应该用于合理研发管理场面，为更加实验设计报告室能提供高质量、实惠的单体肿瘤细胞核深入分析工具软件，转向研发管理本职工编辑在体肿瘤细胞核动物学、海上动物学、患病管理机制等的领域得到更加提升