肉的宰后嫩化最主要的归因于肌原化学人造纤维素空间结构设计的损害，肌原化学人造纤维素空间结构设计是由内源性血清淀粉酶质淀粉水解酶生物可降解肌原化学人造纤维素和内部骨架血清构成的。与二十多年来一直都是的关注视点的钙血清酶区别，胱天血清酶（caspases）较近作为感喜好说的话题。胱天血清酶在内部凋亡的审理阶段中起着至关极为重要的角色，里面caspase-3在去逝血清淀粉酶质淀粉水解中的角色是供需双领域和僵化的，由于引起进这一步探析。S-亚硝基化经由调低钙发挥、势能排泄、血清质生物可降解和内部凋亡来调低色泽，包含嫩度和持水作用。下一步探析察觉到S-亚硝基化会调整依靠线粒体的caspase-3级联表现，这可能会是相关肌肉内部凋亡和羊肉产品品质變化的因素。caspase-3的探析侧重点是其与内部凋亡的关心，可是，极少有探析浅析S-亚硝基化调低caspase-3的新机制。

2024年9月由武汉农产品加工大学生张万刚教学团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物技术为该研究提供了亚硝基化淡化组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

常常微信标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年影响力要素：5.7

刊发精力：2024年9月

顾客厂家：南京农业大学

调查建筑材料：蛋白

拜谱给予技术应用：亚硝基化修饰组学

技术性线路：

一、研究探讨结杲

01.Caspase-3特异性

现阶段尚不明了NO对caspase-3的调控角色是否需要归因于NO介导的S-亚硝基化，不同于溶液浓度系数的GSNO当做外源性NO产生，以诱惑caspase-3的身体之外S-亚硝基化。但是指出，与是没有GSNO的组对比，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性同质性降低了（图1），与原先新闻稿相一致。GSNO正确处理降低了caspase-3可溶性的存在愿意仍亟需指出。

图1 有所差异含量的GSNO操作对caspase-3渗透性的影响到

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化数量

调查Caspase-3的亚硝基化数量，以系统阐述GSNO对Caspase-3的反應性。经GSNO治理 后，监测到caspase-3蛋白酶S-亚硝基化比强度提高（图2）。某些结论表面，外源性GSNO培养出来可好成脂caspase-3的身体S-亚硝基化。最令 惊诧的是，在没能GSNO的存在的较组中监测到某个绚烂的S-亚硝基化带，这表面caspase-3应该形成内源性的S-亚硝基化。还有，本调查中caspase-3的S-亚硝基化数量较高，而caspase-3的特异形缩减，这与时候的调查不一。同时，caspase-3的特异形S-亚硝基化绘制位点尚不清理，还需用进一点的思考。

图2 GSNO治理 对caspase-3S-亚硝基化程度的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。深蓝色标签的编码回文序列标识S-亚硝基化肽，灰色标签的C标识S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3生物降解结血清

结淀粉酶为本身极为重要的的肿瘤神经细胞骨架淀粉酶，在形成肌肿瘤神经细胞架构的架构完美性和拉伸性部分起着极为重要的效应，设计S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶生物化学降解的脆弱性存在极为重要的价值。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的起始肌合成玻璃纤维淀粉酶）组相较于，0 μM GSNO组（肌原合成玻璃纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完美结淀粉酶含水量为显著拉低，的提示caspase-3对结淀粉酶存在因素的淀粉酶水解反应效果。在GSNO孵育后，完美结淀粉酶的含水量显然增长（P < 0.05）。与此同时，当GSNO酸度提升时，完美结淀粉酶的含水量继续上涨（P < 0.05）（图5）。这一种遇到发现，SNO淡化的caspase-3以平行依靠的行为阻止结淀粉酶的生物化学降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙球蛋白-T

肌钙淀粉酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶调准管理肩部肌肉伸缩的细细的的一定肌原玻纤淀粉酶。TnT的溶解特性是检则到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化水平下，caspase-3对TnT的溶解时候长为6已知，与Std组（不包含caspase-3和GSNO的肌原玻纤）较之，caspase-3组中30 kDa TnT电影电影片段更为看不出不断增加，体现了caspase-3参与的了TnT的溶解，前者，caspase-3与GSNO的孵育引起30 kDa TnT下滑。在100和200 μM GSNO组两者不检则到看不出的距离(P > 0.05)，而当GSNO的有机废气浓度超过400 μM 时，该电影电影片段更为看不出极大减少(P < 0.05)。许多察觉体现了了SNO装饰语的caspase-3对TnT溶解的减弱效用。结淀粉酶和TnT是caspase-3的敏感脆弱底物，而GSNO补救降低了caspase-3的抗逆性能够 引起肌原玻纤淀粉酶溶解方面降低了。由此可见下面我们来分析一下，NO诱发的S-亚硝基化能够 根据装饰语半胱氨酸残基来调准caspase-3的抗逆性，从根本上进一歩关系其对结淀粉酶和TnT的淀粉酶溶解作用，最后关系牛肉片的质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3化学降解肌钙核蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本的研究致力于刍议S-亚硝基化对caspase-3掩盖的影晌力名词解释后来对羊肉肌原钎维身体之外降解塑料的影晌力。血清S-亚硝基化就能够掩盖caspase-3的半胱氨酸残基，可以影响caspase-3特异性有效降低，进一点抑制作用了其对羊肉肌原钎维血清的血清油脂水解特性。

三、拜谱总结

研发进行了酶活检验，亚硝基化绘制组学了解，WB等论文检测科技手段，得知核核球蛋白S-亚硝基化是可以绘制caspase-3的半胱氨酸残基，这促使了caspase-3活力性的调低，并举步仰制了其对鸡肉肌原仟维核核球蛋白的核核球蛋白电离水平。本研发为释意核核球蛋白质亚硝基化对肉肥的调整机能能提供了个新的感觉。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清酶质组学、修饰语蛋清酶质组学、代谢转化组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系企业产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total氧化反应重现、解离巯基，欢迎大家咨询！

考虑毕业论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663